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超纯Biolonase核酸酶,纯度≥99%(编号:BLE001-1A)

超纯Biolonase核酸酶



产品分类

99999999
  • 超纯Biolonase核酸酶,纯度≥99%(编号:BLE001-1A)

  • 英文名称
    Biolonase Nuclease
  • Cas 号
    9025-65-4
  • EC 编号
    3.1.30.2
  • 来源
    Serratia marcescens
  • 包装
    10KU/40ul
    50KU/200μl
    100KU/400μl
    500KU/2ml
    5000KU/20ml
  • 库存
    49999
  • 购买数量
  • 价格
    0.00元

产品货号

原始货号

产品名称

包装规格

BLE001-1A-10KU

BLZ02-10KU

超纯Biolonase核酸酶,纯度≥99%

10KU/40μl

BLE001-1A-50KU

BLZ02-50KU

50KU/200μl

BLE001-1A-100KU

BLZ02-100KU

100KU/400μl

BLE001-1A-500KU

BLZ02-500KU

500KU/2ml

BLE001-1A-1000KU

BLZ02-1000KU

1000KU/4ml

BLE001-1A-5000KU

BLZ02-5000KU

5000KU/20ml

Biolonase®核酸酶是利用基因工程技术生产的的源于Serratia marcescens 的非特异性核酸内切酶Merck/Sigma公司的Benzonase®核酸酶来源相同。是去除核酸、降低 DNA 残留的理想手段。

Biolonase®核酸酶具有广泛的水解核酸的能力,能够降解各种形式 DNA 和 RNA,对单链、双链、线状、 环状和超螺旋形式的 DNA 和 RNA,对核酸没有序列要求。Biolonase®核酸酶具有极高的活性,比活力高达 106U/mg 蛋白以上,只需极少的量就可以有效降低核酸含量(1 单位 Biolonase®核酸酶在 37℃的标准条件下可完全水解 37µg 的 DNA);Biolonase®核酸酶带有His标签,可以采用Ni柱去除
Bioloanse®核酸酶与相同规格的Benzonase核酸酶质量一致。 通过对表达方式及工艺改进,使成本得到较大幅度降低,Biolonase®核酸酶价格远低于进口产品,是Benzonase 的理想替代品。
酶学编号
EC 3.1.30.2
CAS编号
9025-65-4
  
大肠杆菌(E.coli
  
溶液(含50%甘油)
  
250U/ul
  
超纯Biolonase核酸酶:≥99
包装规格
10KU / 50KU / 100KU / 500KU / 2000KU / 5000KU
酶特性
分子量:27.7KDa(SDS)等电点:6.85
单位定义
一个活性单位U)是指3730min导致260nm光吸收度增加1.0的酶量,条件为50 mmol/L Tris-HCl (pH8.0),1.0 mmol/L MgCl2,100µg/ml牛血清白蛋白,1mg/ml经声波处理的鲑鱼鱼精DNA。(高氯酸沉淀后测定260nm光吸收)
贮藏条件
温度: -25℃~-10℃ (避免低于-25 ℃冻结,冻结后易导致活性部分丧失
有效期: 24

推荐使用条件

储存缓冲液20 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 2 mmol/L MgCl2, 20 mmol/L NaCl, 50%(v/v)甘油

最适pH8.0pH适用范围610,可用50 mmol/L TRIS-HCLPBS的缓冲体系

最适温度:37℃,温度适用范围042

反应时间:(1537)时,反应时间3060min;(28)时,反应时间60min以上温度越低,需要延长反应时间才能达到效果)

辅助因子:向反应体系加入适量MgCL2,使得Mg2+ 达到  210mmol/L,促进反应。

用量:Biolonase核酸酶有效工作浓度为10100u/ml,首次使用建议50u/ml

用法:建议在悬浮菌体时加入Biolonase核酸酶尽早加入可增加反应时间,降低核酸效果越好

典型应用

  1. 用于除去产品中的DNA/RNA

中国药典2020版三部对Vero细胞培养疫苗要求外源DNA残留不超过100pg·剂量-1,乙型脑炎灭活疫苗不高于100pg·剂量-1冻干人用狂犬病疫苗不高于3ng·剂量-1,大肠杆菌及酵母表达的治疗类基因工程重组产品,其残余DNA应不超过10ng·剂量-1,对于CHO细胞表达的重组蛋白制品,DNA残留量不超过100pg·剂量-1Biolonase核酸酶可以将核酸水解为35个碱基对的寡聚核苷酸碎片,这些片断极易被除去或不被检出(同时也不具有大分子DNA所具有的危害),从而使产品核酸含量符合要求。

  1. 用于降低细胞破碎后的粘度

Biolonase核酸酶可以水解核酸,降低细胞溶解产物的粘度,从而提高蛋白质的产量、改善离心分离效果、使过滤(尤其是超滤)变得容易、增加层析纯化的效率。

  1. 用于微粒处理过程中改善微粒的纯化过程

核酸很容易粘附在病毒颗粒、包涵体颗粒等细胞生成颗粒的表面,造成这些颗粒的凝聚,使颗粒大小或电荷发生改变而影响分离。Biolonase核酸酶能有效的避免核酸的对纯化影响、提高产量。

  1. 用于生化分析中样品的制备

ELISA、色谱分析、双相电泳和足印分析中,用核酸酶处理含有核酸的样品,可以提高分辨率、提高回收率。

应用举例

1. 降低大肠肝菌裂解液黏度

取大肠杆菌BL21DE37.5g(湿重)悬浮于15ml缓冲液(10 mmol/L Tris-HCl1 mmol/L EDTApH9.0)。加入MgCl2使其终浓度为6 mmol/L。分别取5ml大肠杆菌悬浮液,加入核酸酶使其浓度递增。

加入核酸酶后,悬浮液通过高压匀质器(10000psi),然后立即放入0下。在不同的时间间隔,用枪头吸入悬浮液,然后滴下,获得水滴效果判定粘度降低标准。以下为不用酶用量,与粘度降低所需时间对比。

核酸酶使用浓度(U/ml

 水滴效果所用min

0.24

>60

2.40

15

8.0

5

24.0

1.25

2. 核酸去除

将鲱鱼精子DNA溶于缓冲液(50 mmol/L Tris-HCl1 mmol/L MgCl20.1mg/ml BSApH8.0)中,制备成供试液。供试液在不同温度下(02337)用不同浓度的Biolonase核酸酶处理。在不同的时间间隔,取出10μl(最初含有500ng DNA)转移到硝酸纤维素膜上。以用32P标记的鲱鱼精子DNA为探针,进行斑点杂交。标准DNA量从100ng10pg,用于核酸残留半定量计算。

不同处理时间后剩余可杂交鲱鱼精DNA量(ng

Biolonase核酸酶浓度

0h

4h

6h

22h

90U/ml

500

0.2

0.02

无斑点

9U/ml

500

5

2

0.3

Biolonase核酸酶浓度为90U/ml,供试液在不同温育时间下残留DNA量(ng

孵育温度

0h

4h

6h

22h

30h

37

500

0.20

0.02

无斑点

无斑点

23

500

0.5

0.100

0.01

无斑点

0

500

1

0.500

0.05

0.01

Biolonase核酸酶浓度为90U/ml,供试液在不同温育时间下残留DNA量(ng

缓冲液

0h

4h

6h

22h

30h

Tris23

500

0.2

0.02

无斑点

无斑点

PBS23

500

0.5

0.1

0.01

无斑点

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