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SUMO蛋白酶(编号:BLE028-1B)

SUMO蛋白酶



产品分类

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  • SUMO蛋白酶(编号:BLE028-1B)

  • 英文名称
    SUMO Protease
  • Cas 号
    /
  • EC 编号
    /
  • 来源
    酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
  • 包装
    200U/20μl
    1000U/100μl
    10KU/1ml
    200KU/20ml
  • 库存
    40000
  • 购买数量
  • 价格
    0.00元

产品货号

产品名称

包装规格

BLE028-1B-200U

SUMO蛋白酶

200U/20μl

BLE028-1B-1000U

1000U/100μl

BLE028-1B-10KU

10KU/1ml

BLE028-1B-200KU

200KU/20ml

来源于大肠杆菌重组表达的SUMO蛋白酶(SUMO Protease,也称为ULP蛋白酶,是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶。SUMO蛋白酶以一种非常特异的方式切割蛋白,相对于 EK TEV 等蛋白酶的短小识别位点,它特异性识别类泛素(UBL)蛋白的三级结构-SUMO(Small Ubiquitin-LikeModifier),而不是特定氨基酸序列,酶切后目的蛋白残留有多余氨基酸。 SUMO酶不对目标蛋白进行切割,酶切割融合蛋白后释放的目的蛋白不带多余的氨基酸,在基因工程的表达中是一个理想的工具。该酶可在较广泛的温度pH范围内发挥作用。本公司生产的SUMO蛋白酶含有His标签,保证了SUMO蛋白酶高亲和力的结合Ni-NTA。酶切后,可通过Ni-NTA Resin亲和纯化,很容易地将SUMO标签、SUMO蛋白酶去除。

产品名称

SUMO蛋白酶(SUMO Protease

酶学编号

/

CAS编号

/

    

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae

    

溶液(含50%甘油)

  

10U/μl

  

≥95%SDS-PAGE

单位定义

1个活性单位(U)是指在30°CpH 8.0条件下反应1h,能够切割2μg对照底物达90.0%以上所需要的酶量

  

融合蛋白标签剪切去除

贮藏条件

温度:-25℃~ -10℃保存 (注:避免温度低于-25℃发生冻结;若长时间冻结会导致活性部分丧失)

有效期:24个月

酶切条件

1由于不同目的蛋白具有不同的特性,所以在实际使用时,建议对酶和待酶切的目的蛋白的比例进行适当优化

2带有SUMO标签的目的蛋白酶切反应的温度与时间,可以视情况进行适当调整,参考如下。

反应温度

反应时间

4℃

15-16h

16℃

4h

25℃

1.5h

30℃

1h

320μL样品进行SDS-PAGE电泳分析,确定反应所需的合适酶量。在实际操作过程中,如果有必要,还可以在上述反应的不同时间点取少量样品,后续通过电泳分析来确定优化的反应时间。

4如果目的蛋白要求低温,可将反应体系置于4℃,延长反应时间,并适当增加SUMO Protease用量,以确保酶切效果。

推荐使用条件

储存缓冲25 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 250 mmol/L NaCl, 0.1% NP-40, 0.5 mmol/L DTT, 50% (v/v) 甘油。

10×SUMO Protease Buffer500 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0), 2% NP-40, 10 mmol/L DTT

注意事项:

1SUMO Protease进行酶切时的最适pH值为8.0,最佳酶切温度为30℃。但SUMO Protease在较宽的pH范围(6.0-10.0)在较宽的温度范围(2~30℃),较宽的离子强度范围(0-400mM NaCl)内均具有较高的酶活性。在实际操作过程中,为尽量保持目的蛋白的结构和生物活性,建议在4℃SUMO Protease酶切过夜。

2SUMO Protease在还原剂DTT(0.5~2mM)存在的情况下酶切活性更高,酶切体系中加入适当浓度DTT可以显着提高酶切效率,尤其是在长时间的酶切过程中,例如4ºC酶切过夜。

3为达到最好的酶切效果,请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。对于大部分融合蛋白,SUMO 蛋白酶所需 NaCl 的浓度不同的蛋白情况会有所差别,可根据实际情况在0300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到最佳的效果。

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