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TEV蛋白酶(GST标签)(编号:BLE014-2B)

TEV蛋白酶(GST标签)



产品分类

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  • TEV蛋白酶(GST标签)(编号:BLE014-2B)

  • 英文名称
    TEV Protease (GST-tag)
  • Cas 号
    /
  • EC 编号
    /
  • 来源
    烟草蚀纹病毒(TEV)
  • 包装
    1KU/1ml
    10KU/10ml
    50KU /50ml
    100KU/100ml
  • 库存
    40000
  • 购买数量
  • 价格
    0.00元

产品货号

产品名称

包装规格

BLE014-2B-1KU

TEV蛋白酶(GST标签)

1KU/1ml

BLE014-2B-10KU

10KU/10ml

BLE014-2B-50KU

50KU /50ml

BLE014-2B-100KU

100KU/100ml

TEV 蛋白酶(GST标签)是一种在大肠杆菌中重组表达的带GST标签的来源于烟草蚀纹病毒(TEV)的半胱氨酸蛋白酶,能特异性地识别七肽序列Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/Ser,并在GlnGly/Ser氨基酸残基之间进行酶切,常用于去除融合蛋白的GSTHis或者其它标签的蛋白酶。TEV 蛋白酶(GST标签)酶切上述七肽序列,标签蛋白被酶切后,在目的蛋白的N端仅有一个额外的Gly/Ser氨基酸残基,最大限度地减少了对目的蛋白结构和功能的影响。TEV 蛋白酶另一显著优点是在400mM咪唑中仍有较高活力,因此对于很多用镍柱纯化的GST标签目的蛋白,可直接将TEV 蛋白酶加入含高浓度咪唑的蛋白溶液中,在4℃透析去除咪唑的同时进行酶切。也可以在透析后再用TEV蛋白酶进行酶切以去除标签。

TEV 蛋白酶(GST标签)适用于酶切带有GST标签的重组蛋白,因为酶切后没有完全酶切的重组蛋白、切除的GST标签以及TEV 蛋白酶 (GST标签)都可以结合于GST纯化介质上而被除去,穿柱液中则含有所需的靶蛋白。

产品名称

TEV蛋白酶(GST标签)

酶学编号

/

CAS编号

/

     

烟草蚀纹病毒(TEV

     

溶液(含50%甘油)

  

1U/μl

  

≥95%SDS-PAGE

单位定义

1个活性单位(U)是指在30℃pH 8.0条件下反应1h,能够切割3μg对照底物达85%以上所需的酶量

  

生物工程下游技术中融合蛋白酶切使用的重要工具酶

可用于TEV蛋白酶识别位点的融合蛋白的切割。

贮藏条件

温度:-25℃~ -10℃保存(注:避免温度低于-25℃发生冻结;若长时间冻结会导致活性部分丧失)

有效期:24个月

推荐酶切条件:

成分

体积

融合蛋白

0.1mg

TEV蛋白酶

20U

10x TEV buffer

10μl

H2O

补加至100μl

温度(

20-37℃

时间(h

12~16

使用注意事项:

1TEV 蛋白酶的最佳酶切温度是30℃,在29-34℃范围内均具有较高的酶活性,当温度达到或高于高37℃时,其酶活性会急剧下降。在实际操作过程中,为尽量保留目的蛋白的结构和生物活性,建议在4℃用TEV 蛋白酶切过夜。TEV 蛋白酶在pH6.0-9.0范围内具有活性,而当pH小于或等于5时,会失去酶活性。

2TEV蛋白酶的活性不会被常见的丝氨酸蛋白酶抑制剂如PMSFAEBSFBestatinPepstatinE-64TLCKEDTA所抑制。但靶向半胱氨酸残基的蛋白酶抑制剂如NEMIAA等,可以显著抑制TEV 蛋白酶的酶活性,因为天然的TEV 蛋白酶含有其维持酶活性所必需的Cys151

推荐使用条件

储存缓冲液25 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 150 mmol/L NaCl, 1 mmol/L EDTA, 5 mmol/L DTT, 50%(v/v)甘油。

10×TEV Buffer500 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 250 mmol/L NaCl, 5 mmol/L EDTA, 10 mmol/L DTT

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021-54421557
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